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武漢德晟生化科技有限公司  

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蛋白、DNA及RNA中緩沖液的區別
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品牌 德晟
過期 長期有效
更新 2021-08-03 14:10
 
詳細信息

上樣緩沖液即loading buffer,是蛋白質、核酸DNARNA的研究實驗中溶解和添加樣品時所用的一類上樣緩沖液,蛋白質、DNARNA是不同的樣品,其上樣緩沖液也有所區別。

蛋白上樣緩沖液的組成

其緩沖液主要采用Tris-HCl(三羥甲基氨基甲烷***)或Tris甘氨酸、與EDTA鹽(乙二胺四乙酸二鈉),還需添加SDSDTT(二流蘇糖醇),溴酚藍,甘油等。

蛋白、DNARNA的上樣緩沖液區別

SDS可與蛋白質結合使蛋白質-SDS復合物上帶有大量的負電荷,這時蛋白質本身的電荷完全被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質本身電荷的差異;SDS還可以斷開分子內和分子間的氫鍵,破壞蛋白質分子的二級和三級結構。DTT可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質結構,消除了蛋白結構之間的差異。最終無電荷及結構上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關。溴酚藍用作電泳時的指示劑,可大概指示電泳結束的時間。

核酸上樣緩沖液的組成

核酸包括DNARNA,其上樣緩沖液主要含有Tris-HCl,以及染料二***青FF、溴酚藍(指示劑)等。指示劑溴酚藍和二******FF起到指示的作用是顯示電泳的進程,以便我們適時終止電泳。DNARNA的上樣緩沖液基本可以通用,它們的堿基基本一致,緩沖液中的染料都可與其堿基結合,跑出條帶。不過,如果使用DNA上樣緩沖液,里面會夾雜一些RNA酶,這些酶有可能會影響到實驗結果,使用前需要將RNA酶處理掉。

需注意的是,雖然DNARNA的上樣緩沖液有時可以通用,但是它們與蛋白緩沖液是不能通用的。德晟是診斷試劑原料廠家,可提供蛋白與核酸研究相關的TrisMOPSCAPS等多種緩沖劑。

 

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